化学发光法主要生产工艺
三、主要生产工艺(以微孔板载体的化学发光酶分析为例进行描述)
(二)滴配过程
1.酶结合物(也称酶标记物)的制备(根据各产品实际情况,该步骤可不进行)
采用常规钠——乙二醇法将相关的(或抗原)标记辣根---化物酶(或其他酶),酶标记后的(或抗原)应加入适当的保护剂保存于低温。
常规质控项目:标记方法,过程控制。
2.酶结合物的鉴定
(1)功能性实验
将酶结合物用酶稀释液稀释后,用于产品的滴配,其结果应符合相关试剂盒的标准。
(2)稳定性
将酶结合物用酶稀释液稀释,进行2~8℃,及热稳定性实验,滴配结果应符合相关试剂盒的标准。
3.酶结合物稀释液
按酶结合物稀释液的配方配制,存放在2~8℃保存,并于规定时间内使用。
常规质控项目:酶结合物稀释液配方,ph值。
4.酶结合物工作浓度的滴配
取酶结合物,用酶结合物稀释液稀释到不同的浓度,用已制备好的反应板进行滴配。测定系列标准品及相应的质控品,确定使体系达到优的酶结合物工作浓度。
5.酶结合物工作液配制
将所需量酶结合物和酶结合物稀释液按滴配浓度混合均匀。
质检项目:分装前检验,用配套的反应板进行检验,外观、灵敏度、质控品测定值、定量产品应作校准品线性检测。
6.酶结合物工作液的分装
按工艺要求分装酶结合物工作液。
常规质控项目:分装前确认试剂名称、批号、数量,分装量,封装后密封性。
7.酶结合物工作液(半成品)检验
对分装后的酶结合物工作液进行抽样检验,外观、分装量、灵敏度、校准品剂量-反应曲线线性、质控品测定值。
6840 体外诊断试剂分类子目录(2013版)-- ⅲ-2 与血型、组织配型相关的试剂:
凝聚胺试剂
abo血型定型试剂
abo血型反定型试剂
rhd血型定型试剂
rh血型---试剂
抗d(igm)血型定型试剂
抗d(igg)血型定型试剂
抗人球蛋白检测试剂
血小板抗kang体检测试剂
hla-dna分型检测试剂
红细胞抗kang体筛选试剂
二、化学发光分析的类型
(一)化学发光标记分析
化学发光标记分析又称化学发光分析(clia),是用化学发光剂直接标记抗原或的分析方法。常用于标记的化学发光物质有酯类化合物(ae)。
(二)化学发光酶分析
从标记分析角度,广州装修,化学发光酶分析(cleia),应属酶分析,只是酶反应的底物是发光剂,操作步骤与酶免分析完全相同:以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或)进行反应,净化车间设计,反应复合物上的酶再作用于发光底物,洁净厂房设计与装修,在信号试剂作用下发光,用发光仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根---化物酶(hrp)和碱性磷酸酶(alp),它们有各自的发光底物。
(三)时间分辨荧光分析(trfia)
是用三价稀土离子及其螯合剂作为示踪物,如铕(eu3+)、铽(te3+)及钐(sm3+)、镝(de3+)等代替传统的荧光物质、性同位素、酶和化学发光物质,来标记、抗原、多肽、、---探针或生物活性细胞,待反应体系发生后,体外诊断试剂装修,用时间分辨荧光仪测定后产物中的荧光强度,根据荧光强度和相对荧光强度比值,判断反应体系中分析物的浓度,达到定量分析的目的。
(四)电化学发光分析(eclia)
是电化学发光(ecl)和测定相结合的产物,是一种在电极表面由电化学引发的特---化学发光反应,包括了电化学和化学发光二个过程。ecl 反应底物有两种:---联钌[ru(bpy)3]2+、络合物三丙胺(tpa)。
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